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　　第二十五單元 病毒感染的檢查方法和防治原則

　　重點提示

　　本單元2000～2009年約考過l題。

　　本單元題量不大�？忌鷳�重點掌握病毒感染免疫預防中主動免疫和被動免疫的特點及常用制劑。熟悉病毒分離培養(yǎng)方法、病毒感染的血清學診斷方法。了解標本的采集和送檢。

　　考點串講

　　一、病毒感染的檢查方法

　　(一)標本的采集與送檢

　　1.供分離病毒、檢出核酸及抗原的標本采集原則

　　(1)標本采集時間：在發(fā)病初期(急性期)采集標本，較易檢出病毒。

　　(2)標本采集部位：最好在感染部位采取。

　　(3)標本運輸：盡快冷藏送檢，標本在處理、接種前切忌反復凍融，病變組織則應保存于50%的甘油緩沖鹽水中。

　　(4)標本的處理與儲存：采集標本時要注意無菌操作。臨床標本中可加入高濃度的抗生素。盡量及時接種，如不能當時接種，標本應保存在一70℃低溫冰柜或液氮中。

　　2.供血清學檢測的標本采集原則 檢測特異性抗體需要采取急性期與恢復期雙份血清，血清標本應在一20℃保存，試驗前血清標本以56℃30min處理去除非特異性物質(zhì)及補體。

　　(二)病毒分離

　　1.細胞培養(yǎng)

　　(1)培養(yǎng)細胞分類

　�、僭�代細胞：常用人胚腎、猴腎、雞胚等原代細胞，對病毒的敏感性高，可用于生產(chǎn)病毒疫苗，但不能持續(xù)傳代培養(yǎng)，故不便用于診斷。

　�、诙�倍體細胞：染色體數(shù)為二倍體，生長迅速，并可傳50代保持二倍體特征，可用于制備病毒疫苗，也可用于病毒的實驗室診斷。

　�、蹅鞔�細胞系：由癌細胞或二倍體細胞突變而來，染色體數(shù)為非整倍數(shù)，細胞生長迅速，可無限傳代，在液氮中能長期保存，目前廣泛用于病毒的實驗室診斷。

　　(2)細胞培養(yǎng)中病毒的鑒定

　�、俨《驹诩毎麅�(nèi)增殖的特征：細胞病變效應、紅細胞吸附現(xiàn)象、干擾現(xiàn)象。

　�、诓《靖腥拘缘亩�量測定：空斑形成單位測定、50%致死量(LD50)和50%組織細胞感染量(TCID50)的測定、病毒形態(tài)與結(jié)構(gòu)的觀察。

　�、鄄《镜牟≡瓕W鑒定。

　　2.動物接種 常用大鼠、小鼠、豚鼠、家兔和猴等動物。

　　3.雞胚接種

　　(三)病毒抗原的檢測

　　1.免疫熒光法

　　2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)

　　(四)病毒抗體的檢測

　　1.中和試驗 病毒在活體內(nèi)或細胞培養(yǎng)中被特異性中和抗體作用而失去感染性的一種試驗。

　　2.補體結(jié)合試驗 常用病毒內(nèi)部可溶性抗原檢測血清中IgM類抗體。

　　3.血凝抑制試驗

　　(五)病毒核酸的檢測

　　1.核酸雜交技術 包括斑點核酸雜交、細胞內(nèi)原位雜交、DNA印跡雜交和RNA印跡雜交等。

　　2.PCR技術

　　3.高通量的病毒核酸檢測技術

　　二、病毒感染的防治原則

　　(一)病毒感染的免疫預防

　　1.人工主動免疫 預防病毒感染的人工主動免疫生物制品主要有減毒活疫苗、滅活疫苗、基因工程疫苗及核酸疫苗等幾類。

　　2.人工被動免疫 人工被動免疫是指注射含有抗病毒中和抗體的免疫血清、丙種球蛋自和IL-2，以及與細胞免疫有關的轉(zhuǎn)移因子、干擾素等，使機體立即獲得特異性免疫力(2001)。常見人工被動免疫生物制劑有：普通免疫球蛋白、抗病毒血清、免疫調(diào)節(jié)劑等。

　　(二)抗病毒治療

　　1.化學治療

　　2.免疫治療 ①免疫調(diào)節(jié)或治療劑。②治療性疫苗。③免疫細胞的修飾和回輸。

　　3.基因治療

　　歷年經(jīng)典試題

　　某護士在給一位乙型肝炎病毒(HBV)攜帶者注射時，不慎被病人用過的針頭刺傷手指。為預防乙型肝炎病毒感染，應首先采取的措施是(B)

　　A.注射抗生素

　　B.注射丙種球蛋白

　　C.注射乙型肝炎疫苗

　　D.注射HBIg

　　E.注射α-干擾素

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